El material de fijación ideal es
Los fijadores se utilizaron por primera vez en microscopios ópticos, pero los fijadores de proteínas precipitantes y aglutinados utilizados en microscopios ópticos no son particularmente adecuados para microscopía electrónica. Entonces la gente introdujo tetróxido de osmio y formaldehído neutro para la fijación. En los primeros métodos de fijación química de muestras biológicas para microscopía electrónica, se utilizaba tetróxido de osmio para la fijación única. Sin embargo, el tetróxido de osmio no puede conservar bien los carbohidratos como el glucógeno y la tasa de exudación del tetróxido de osmio en los tejidos es lenta (aproximadamente 2 mm/h). .
El fijador utilizado en los microscopios electrónicos es tóxico, por lo que hay que tener mucho cuidado al operar e intentar completar la operación en una campana extractora. Si el fijador se fuga en el laboratorio, la solución filtrada debe cubrirse inmediatamente con una gran cantidad de leche en polvo y recolectarse y procesarse una vez que la reacción sea suficiente.
Desventajas del fijador
El tiempo de fijación no debe ser demasiado largo. Si el tiempo es demasiado largo, el tejido se volverá quebradizo y difícil de cortar. Además, los complejos formados por la reticulación del tetróxido de osmio con proteínas y ácidos grasos insaturados son fácilmente solubles en agua, especialmente después de una fijación prolongada. Por tanto, es más apropiado fijar la muestra con tetróxido de osmio y controlar el tiempo a 12 horas.
El tetróxido de osmio puede sufrir reacciones de oxidación-reducción con etanol o aldehídos para producir precipitación. Por lo tanto, las muestras tratadas con aldehído deben enjuagarse completamente con el tampón correspondiente antes de la fijación con tetróxido de osmio o la deshidratación con una solución de etanol después de la fijación con tetróxido de osmio.