¿Qué tal el kit de extracción de ARN vegetal de Beijing Adelaide Company que llena el vacío en Qiagen? ¿Es fácil de usar?
¡El kit de extracción de ARN vegetal de Beijing Aidelai Company que llena el vacío de Qiagen es muy fácil de usar y se vende relativamente bien!
Ahora proporciono información para su referencia, espero que pueda ayudarlo;
Llenar el vacío en el kit de extracción de ARN vegetal de Qiagen
Las empresas en general tienen muchas polisacáridos Razones y soluciones del fallo del kit de extracción de ARN vegetal fenólico
Muchas muestras de ARN vegetal contienen una gran cantidad de polisacáridos, polifenoles, metabolitos, pigmentos y otros componentes, provocando oxidación, oscurecimiento y degradación durante la En el proceso de extracción de ARN, la situación es más complicada debido a la diversidad de especies vegetales. La extracción manual del método de clase CTAB requiere demasiado tiempo y es engorrosa, por lo que los métodos manuales no se incluyen en la discusión. No ha habido ningún buen kit, incluidos los importados como Qiagen y Promega, que no pueden cumplir con los requisitos de los investigadores científicos para la extracción de ARN vegetal.
Analicemos los motivos por los que no se puede extraer con éxito el ARN vegetal:
Los kits de extracción de ARN más comunes en el mercado no son más que dos tipos: El primero: método mejorado TRIzol ( Incluyendo el tipo de solución y el tipo de columna de centrifugación), segundo tipo: método de escisión directa a través de la columna (columna de centrifugación)
Razones del fracaso del primer kit 1: El método más popular en el mercado de ARN es TRIzol , o TRIzol modificado, o métodos mejorados como TRIzol plus spin column. TRIzol es el método de un solo paso basado en el principio de isotiocianato de guanidinio/fenol/cloroformo. El objetivo más adecuado son las células de tejido de origen animal. Para materiales de origen vegetal con niveles bajos de polisacáridos y polifenoles ordinarios, también se pueden extraer productos a base de TRIzol. Sin embargo, cuando los polisacáridos, polifenoles y metabolitos secundarios son abundantes, los métodos TRIzol no pueden evitar la interferencia de los polisacáridos y polifenoles en la separación de fases de ARN/ADN, ya sea que quede una gran cantidad de ADN o una gran cantidad de polisacáridos, polifenoles o metabolitos secundarios. La oxidación destruye el ARN o los polisacáridos residuales, polifenoles, metabolitos de pigmentos, etc., inhiben la transcripción inversa y otras reacciones posteriores. Debido a limitaciones técnicas, la gran mayoría de los fabricantes nacionales del mercado utilizan el método TRIzol para mejorar, independientemente de si añaden una columna de centrifugado o no. Sin embargo, la práctica ha demostrado que las mejoras no pueden resolver fundamentalmente el problema. Determinar si el kit utiliza este método modificado es muy sencillo: si la solución de lisis contiene olor a fenol y utiliza cloroformo. Si se utiliza cloroformo, es una mejora del método TRIzol.
El motivo del fracaso del segundo kit: el método de escisión directa a través de la columna es actualmente el método más avanzado, pero también es el método con mayor contenido técnico. Este método utiliza una solución de lisis (sin fenol ni cloroformo) para escindir directamente el ARN/ADN a través de la columna al mismo tiempo y luego separar directamente el ARN/ADN en la columna. Por lo tanto, la primera ventaja de este método es que evita el uso. de trizol en polisacáridos La segunda desventaja de no poder aislar con éxito ARN/ADN en condiciones de fenol es que no se utiliza fenol cloroformo, que es tóxico. Sin embargo, es precisamente por su avanzada tecnología que es muy difícil para los fabricantes nacionales, incluidas las empresas importadoras, dos dificultades técnicas que no han superado. Primero, se deben desarrollar los componentes de la solución de lisis para la eliminación de polisacáridos y polifenoles, y se deben agregar los componentes de los metabolitos para eliminar polisacáridos y polifenoles. De lo contrario, también se encontrará con el problema de que los polisacáridos y polifenoles interfieran con la extracción. En segundo lugar, el principio es diferente al del TRIzol. En el método de columna directa, se añade ADN/ARN a la columna de adsorción al mismo tiempo. Cómo eliminar el ADN es la primera dificultad. De lo contrario, quedará una gran cantidad de ADN. No superar dos dificultades técnicas provocó el fracaso del segundo kit incluido por empresas nacionales. Debido a que las empresas extranjeras no han superado la primera dificultad, los componentes de polisacárido y polifenol no se eliminan de la solución de lisis, por lo que el mini kit de plantas RNeasy de Qiagen a menudo no logra extraer con éxito muestras de ARN de plantas más complejas, como grosella negra, acebo y otras muestras de plantas.
Después de tres años de I+D y mejora continua, el personal de I+D de Beijing Adelaide Biotech desarrolló el RN09 EASYspin líder mundial basándose en las características de las plantas de polisacáridos y polifenoles y las razones del fracaso de estos dos kits. Kit de extracción rápida de ARN vegetal, primero: adopta el método de columna directa, abandona por completo el TRIzol fenol, el método del principio de cloroformo, utiliza materias primas no tóxicas y agrega componentes de polisacáridos y polifenoles con derechos de propiedad intelectual independientes para resolver el problema de los polisacáridos y polifenoles. dañar e interferir con el aislamiento del ARN. Segundo: supera las dificultades técnicas de la eliminación de ADN al pasar directamente a través de la columna y resuelve el problema del exceso de residuos de ADN.