El contenido principal de la virología.
Los ácidos nucleicos se dividen en ADN y ARN, monocatenarios y bicatenarios, lineales y circulares. Para el ARN monocatenario, existen diferencias de polaridad, que se dividen en ARN de cadena positiva (+ARN), ARN de cadena negativa (-ARN) y ARN ambisentido (una parte del genoma es positiva; la otra parte es negativa). ). ARN de cadena positiva (+RNA) con o sin estructura hat, ARN de cadena positiva (+RNA) sin estructura hat genoma 5, con * * * proteína de unión a valencia en el extremo poli(A) o sin poli(A); el extremo 3'. Averiguar la composición y secuencia de nucleótidos del genoma viral; comprender el número, la ubicación y la función de los marcos de lectura abiertos en el genoma; comprender el impacto de los elementos de secuencia repetitivos y las unidades reguladoras del genoma viral en la replicación y expresión de genes virales; ciclo de replicación viral Genes estructurales, genes reguladores y sus productos codificados por los virus, así como su relación con genes celulares y sus productos de expresión.
2) Regulación de la expresión génica viral
La expresión génica incluye dos aspectos: transcripción y traducción.
Transferencia
(1) Algunos virus utilizan ARN polimerasa codificada por su propio genoma.
(2) Algunos son completamente dependientes de la ARN polimerasa del huésped.
(3) Ciertas proteínas reguladoras codificadas por genes reguladores reemplazan ciertos factores en la ARN polimerasa de la célula huésped, cambiando así la vía de transcripción de la ARN polimerasa del huésped.
(4) Utilizando promotores o potenciadores, los factores reguladores codificados por células o virus se unen o actúan sobre estos elementos reguladores, afectando así a la expresión de los genes virales.
(5) Tapado de extremos, adición de cola poli(A) al extremo 3′, escisión de intrones y empalme de ARNm.
Virología
Traducido de la versión traducida a un tercer idioma
Dado que la síntesis de proteínas depende completamente del sistema de traducción celular, los virus pueden utilizar sus propios mecanismos específicos. Tomar el control y utilizar el sistema de traducción del host. Por ejemplo, la enzima proteolítica 2A del poliovirus inactiva el complejo de proteína de unión a caperuza (CBP), lo que resulta en la incapacidad de traducir el ARNm del huésped con una estructura de caperuza, mientras que el sistema de traducción del huésped puede traducir con éxito el ARNm viral que carece de una estructura de caperuza.
3) Mecanismos moleculares de la infección viral
El contenido de la investigación no solo incluye las características del ciclo de infección como la adsorción, invasión y liberación del virus, sino también los mecanismos moleculares de la patogenicidad viral. y efectos inmunológicos del huésped.
Implica principalmente el reconocimiento mutuo y la interacción entre las proteínas de adsorción del virus y las proteínas receptoras de la célula huésped; el mecanismo de infección viral aguda y persistente, especialmente la infección no citotóxica y la evasión del virus del reconocimiento inmunológico del huésped durante el mecanismo de infección persistente.
4) Mecanismo molecular de la carcinogénesis viral
Además de factores genéticos y de otro tipo, la formación de tumores humanos y animales también es causada por algunos virus tumorales, como se indica a continuación:
( 1) El mecanismo por el cual las proteínas transformadoras codificadas por los genes tempranos de algunos virus tumorales de ADN causan la transformación celular y la carcinogénesis animal es que se unen o interactúan con la proteína supresora de tumores P53 o Rb de la célula, causando así la inactivación. de P53 o Rb, lo que lleva a una proliferación celular ilimitada y un crecimiento incontrolado que en última instancia induce la transformación celular y la formación de tumores.
(2) Los genomas de algunos virus tumorales de ARN portan oncogenes virales. La transformación celular y la carcinogénesis de estos virus tumorales de ARN están relacionados con la actividad de expresión de los oncogenes virales.
(3) Entre los virus de ARN, algunos virus como el virus de la leucemia linfocítica T humana 1 (HTLV-1) no contienen oncogenes virales y su ADN proviral no se inserta ni integra preferentemente cerca de oncogenes celulares. . Sin embargo, pueden regular las proteínas a través de su propio genoma P40tax y transactivar la expresión de genes relacionados con la proliferación celular, provocando así una proliferación celular ilimitada e induciendo cáncer.
5) Sustancias activas antivirales
El interferón es el mecanismo más claramente estudiado entre los péptidos antivirales. Se encuentra en casi todos los mamíferos y no sólo es antiviral sino que también tiene efectos inmunomoduladores y supresores de tumores. En 1979, el gen del interferón fue clonado y expresado con éxito por primera vez. Después de años de desarrollo, se ha convertido en un importante fármaco antiviral.
Las linfoquinas recombinantes clonadas como la IL-1, la IL-2 y el factor de necrosis tumoral (TNF) también tienen una fuerte actividad antiviral.
La actividad antiviral del ARN antisentido también ha recibido amplia atención.
Principalmente al hibridarse con su ARNm o ADN viral correspondiente, bloquea la función del ARNm viral que codifica y sintetiza proteínas, destruyendo así el ciclo de replicación viral y logrando el propósito de infección antiviral, prevención y tratamiento de enfermedades.
La ribozima es una molécula de ARN que hidroliza el ARN diana. Después de hibridarse con la secuencia objetivo, la ribozima puede escindir enlaces fosfodiéster específicos en el ARN.
6) Vacunas virales de ingeniería genética
Las vacunas, especialmente las virales, se han convertido en el medio más importante y eficaz para que las personas prevengan enfermedades infecciosas, y son cada vez más valoradas por la comunidad biomédica. . Especialmente en los últimos 30 años, el rápido desarrollo de la tecnología de bioingeniería y la tecnología de biología molecular ha promovido en gran medida la investigación y el desarrollo de vacunas. En términos generales, la tecnología tradicional puede producir virus con mecanismos de protección inmune claros que son fáciles de cultivar. Sin embargo, algunos virus con mecanismos de protección inmune poco claros pueden producir reacciones inmunopatológicas, tener efectos tumorigénicos potenciales o son difíciles de cultivar y producir vacunas utilizando. métodos tradicionales, que pueden resolverse mediante ingeniería genética. Es necesario tener en cuenta las siguientes cuestiones al utilizar este método:
(1) Utilice un sistema de expresión apropiado, independientemente de si el producto de expresión es inmunogénico o no.
(2) Eficiencia de expresión del sistema de expresión
(3) Purificación conveniente de los productos de expresión