Cómo utilizar y almacenar anticuerpos
1. ¿Qué son los anticuerpos?
Los anticuerpos son proteínas producidas por algunos linfocitos para resistir directamente a las moléculas extrañas. Son un componente importante del sistema inmunológico y una herramienta importante en el laboratorio.
Los anticuerpos policlonales son una mezcla de múltiples inmunoglobulinas con diferentes afinidades producidas directamente mediante la inyección de antígenos en animales y dirigidas contra diferentes determinantes antigénicos de una misma proteína.
Los anticuerpos monoclonales se preparan in vitro y se producen mediante la fusión de células de linfoma inmune y células plasmáticas secretoras de anticuerpos. El cultivo completo sólo produce un tipo de anticuerpo (a menudo IgG), que resiste directamente a sustancias extrañas.
2. El papel de los anticuerpos
Los anticuerpos pueden marcarse con elementos radiactivos o enzimas, que pueden hacer visibles o cuantificables las proteínas que reconocen.
Teñir las células. Se pueden utilizar anticuerpos marcados para localizar proteínas celulares.
Determinación inmune. Los anticuerpos se pueden utilizar para detectar la presencia y función de un antígeno.
Tabla 1? Técnicas inmunoquímicas, anticuerpos policlonales y anticuerpos monoclonales
3. Almacenamiento de anticuerpos
Los anticuerpos se almacenan mejor a -20 °C y se dividen en alícuotas, congelando. y descongelar no son buenos para la mayoría de los anticuerpos.
Los anticuerpos en alícuotas se pueden almacenar a 4 ℃ durante al menos 6 meses.
Añadir azida sódica hasta una concentración final del 0,02% para evitar el crecimiento bacteriano.
4. Consejos cálidos
Necesitas saber de qué animal se produce tu anticuerpo, para luego poder decidir qué tipo de anticuerpo secundario usar. Los anticuerpos policlonales se suelen utilizar en conejos o monos, y los anticuerpos monoclonales se suelen utilizar en ratones, ratas y hámsteres.
Centrifugar para eliminar cualquier precipitado antes de su uso, lo que puede evitar niveles elevados de fondo en algunas operaciones.
La Proteína A, un polipéptido de 42 kDa aislado de la pared celular de S. aureus; la Proteína G, un polipéptido de 30-35 kDa aislado de Streptococcus β-hemolítico, ambos se unen fuertemente a los anticuerpos, se utilizan. para inmunoprecipitar o localizar anticuerpos. Se pueden usar proteínas A y G para unir o marcar perlas y son adecuadas para la mayoría de las subclases de anticuerpos.